羧酸酯酶(CarE)測(cè)試盒

商品詳情：
測(cè)定意義：

哺乳動(dòng)物CarE，也稱脂族酯酶(aliesterase)，廣泛分布于組織和器官，屬于絲氨水解酶家族。CarE催化含酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵的內(nèi)源性與外源性物質(zhì)水解，但不能催化水解乙酰dan堿及其類似物。CarE參與脂質(zhì)運(yùn)輸和代謝，并且與多種藥物、環(huán)境毒物以及致癌物的解毒和代謝有關(guān)，有機(jī)磷農(nóng)藥可結(jié)合并且抑制CarE活性。

測(cè)定原理：

CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯，固籃顯色；在450 nm光吸收增加速率，計(jì)算CarE活性。

自備儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

Archease蛋白ELISA試劑盒 ARCH免費(fèi)代測(cè)試劑

Archain1蛋白ELISA試劑盒 ARCN1免費(fèi)代測(cè)試劑

Aprataxin蛋白ELISA試劑盒 APTX免費(fèi)代測(cè)試劑

APEX核酶2ELISA試劑盒 APEX2免費(fèi)代測(cè)試劑

APEX核酶1ELISA試劑盒 APEX1免費(fèi)代測(cè)試劑

Apelin36蛋白ELISA試劑盒 AP36免費(fèi)代測(cè)試劑

Apelin17蛋白ELISA試劑盒 AP17免費(fèi)代測(cè)試劑

Anoctamin9蛋白ELISA試劑盒 ANO9免費(fèi)代測(cè)試劑

Anoctamin8蛋白ELISA試劑盒 ANO8免費(fèi)代測(cè)試劑

Anoctamin7蛋白ELISA試劑盒 ANO7免費(fèi)代測(cè)試劑

Anoctamin6蛋白ELISA試劑盒 ANO6免費(fèi)代測(cè)試劑

Anoctamin5蛋白ELISA試劑盒 ANO5免費(fèi)代測(cè)試劑

Anoctamin4蛋白ELISA試劑盒 ANO4免費(fèi)代測(cè)試劑

Anoctamin3蛋白ELISA試劑盒 ANO3免費(fèi)代測(cè)試劑

Anoctamin2蛋白ELISA試劑盒 ANO2免費(fèi)代測(cè)試劑
羧酸酯酶(CarE)測(cè)試盒50管/24樣-N-脫甲基酶(ERND)測(cè)試盒/分光光度法

100T/48S-N-脫甲基酶(ERND)測(cè)試盒/微量法

50管/48樣琥珀脫氫酶(SDH)測(cè)試盒/比色法

50管/48樣琥珀脫氫酶(SDH)測(cè)試盒/分光光度法

100管/96樣琥珀脫氫酶(SDH)測(cè)試盒/微量法

50管/48樣花青su還原酶(ANR)測(cè)試盒/分光光度法

100管/96樣花青su還原酶(ANR)測(cè)試盒/微量法

50T/48樣氧化酶(XOD)測(cè)試盒/比色法

50管/48樣氧化酶(XOD)測(cè)試盒/分光光度法
注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。